柱效測試液一般都用什么呢

色譜柱性能評價
    通常,以指定的一組標準溶質為樣品,測定它們在柱子上的理論塔板數，以作為柱效的衡量指標。這種標準溶質的選擇，因不同的色譜模式而異，也因不同的使用目的而有所不同。一般情況下，要求它們具有不同的保留因子（例如，第一個化合物k=0，其余的在2～10范圍內），能反映出對柱子性質的基本要求，而且能在一般的HPLC裝置上得到清晰的信號。例如，對于反相填料，可以選擇一組具有不同極性的芳香族化合物。這一組標準溶質可由苯、萘、菲或苯、甲苯、二甲苯等為基本組分，再添加以苯酚和苯胺等酸、堿性溶液而成。不同的廠家推薦的標準溶質往往相差很大，如有的由尿嘧啶、對位乙基苯和對位丙基苯組成。其中尿嘧啶兼顧了堿性物質；有的廠家推薦用馬來酸、苯胺、二甲基苯胺、苯二甲醛和苯甲醛組成，其目的是觀察它們同時分離性質差異很大的化合物的能力。對堿性物質的分離能力是填料殘余硅羥基和雜質金屬離子含量多少的反映。因此在試樣中加入吡啶便可以很敏感地觀察填料這一方面的性能。各實驗室可根據自己的要求配制自己的標準溶質。也可以采用與一些著名廠家相同的標準溶質系列，以便于與之進行比較。從標準溶質系列的色譜圖，使可以測定出各溶質的理論塔板數N。在測定時N的計算可按下式

N=16(tR/W)2

式中，tR為保留時間；W1/2為半峰高寬度。
    需要注意的是,新購來的柱子在實驗室中所測得的柱效，往往低于生產廠家給出的柱效。排除在保存和運輸中所引起的柱性能的變化等因素外，柱外效應的影響可能是主要的原因。只要將柱外效應減至最?。ㄖ饕亲赃M樣閥至柱頭，以及自柱頭至檢測器的連接管），一般就可以得到滿意的色譜圖。
一、反相色譜柱評價
    對于一根預填充柱來說，最基本的柱性能評價指標是柱效和峰對稱的測定。將柱子接入色譜系統時應盡可能的降低柱外體積。這里所說的柱外體積主要包插進樣閥至柱并沒有和柱尾至檢測器的連接管路的內體積。一般最好使用內徑0.1mm(或0.2mm)的不銹鋼或PEEK管,長度應盡可能地短。過長的管路會使譜帶的峰展寬明顯地加大而降低所測柱效，如前所述，測試樣品可選用一組含芳香環的化合物（例如可由苯、甲苯、萘和苯胺組成），以甲醇或乙腈配成溶液，濃度可為各含0.1mg/ml。流動相可使用乙腈或甲醇的水溶液，如50%～70%的乙腈或65%～85%的甲醇水溶液。對于通常的標準柱型，即Φ4.6mm×250mm的柱子來說，流速以1ml/min為宜。此時的淋洗線速度約為1mm/s。如欲和廠家提供的標準圖相比較，則應選用與廠家相同的測試條件?？赏ㄟ^色譜為工作站等數據處理裝置自動獲取有關數據。
    對于C18以外的反相色譜柱，可視其配基相對疏水性的離低調整流動相中有機溶劑的比例。例如，隨著配基碳鏈的縮短，流動相中乙腈的比例可降低為30%～60%。以鍵合相正相柱作為反相柱使用時，因配基極性較大，也須使用較低濃度的有機溶劑。

二、正相色譜柱評價
    正相色譜柱中以硅膠柱的使用較為普遍，化學鍵合相柱也有重要的應用。其流動相主要以戊烷、己烷、庚烷等弱極性溶劑為主，添加少量極性溶劑，如醚類、酯類、醇類等，以調節其淋洗強度。但這些溶劑和添加劑在所使用的檢測波段的紫外吸收應較低，否則會影響樣品的檢測。正相色譜的分離對象以非極性和中、弱極性物質為主，柱評價的標準混合物一般可使用苯甲酸酯等特質。例如，使用的硝基苯、鄰、間硝基苯胺和對硝基苯胺的混合物，用以評價硅膠正相色譜柱。