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                      液相色譜儀測定人血漿中雙氯西林和阿莫西林

                      來源:杭州賽析科技有限公司   時間:-0-0    瀏覽量:96

                       1儀器與試劑 
                          杭州賽析501高效液相色譜儀,附紫外檢測器UV501;N2010色譜工作站;AT一230色譜柱溫箱。雙氯西林的網絡分析儀和頻譜分析儀精制品、阿莫西林精制品(內標氟氯西林精制品(含量94。0%)、內標替硝唑精制品(含量97。2%);甲醇、乙腈均為一級色譜純,純度99。9%);水為去離子水;其余試劑均為分析純。
                        2色譜條件
                        雙氯西林的色譜條件:島津Shim—packVP—ODS色譜柱(150mm×4。6mm,5);流動相0。05mol-L磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀2。7g,溶于1000mL去離子水中,用氫氧化鉀溶液調pH4。5,過濾)一乙腈(68:32),加0。3%三乙胺;流速1。0mL·min~;網絡分析儀和頻譜分析儀檢測波長225nm;柱溫25;進樣量20trL;內標氟氯西林。阿莫西林的色譜條件:島津Shim—packVP—ODS色譜柱(150mm×4。6mm,5);流動相0。033mol·L磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀2。22g、磷酸氫二鉀2。610g,溶于1000mL去離子水中用氫氧化鉀溶液調pH7。2,過濾)一甲醇(88:12)流速1。0mL·min~;檢測波長229nm;柱溫20℃進樣量20trL;內標替硝唑。
                        3血漿樣品的處理與測定
                        精密移取空白血漿450L,分別加人雙氯西林網絡分析儀和頻譜分析儀或阿莫西林標準工作液50,內標氟氯西林或替硝儲備液5,混勻后,加入冷凍的甲醇500,旋渦混合,置于4℃冰箱15min,14000r·min一離心10min,取20L上清液進樣。
                        4方法與結果
                        4。1色譜分離在上述色譜條件下,雙氯西林網絡分析儀和頻譜分析儀及內標氟氯西林與血漿得到完全分離,其保留時間分別為7。1min和5。5min,如圖1所示;阿莫西林及內標替硝唑與血漿內源峰得到良好分離,其保留時間分別為8。5min和l6。8min。
                        
                      結論:
                        目前,人血漿中阿莫西林的HPLC法報道較多。阿莫西林具有兩性化合物的性質,且與血漿中的極性物質性質相近,因此血漿樣品預處理與色譜分離十分困難。ZhiYuan等用固相萃取法、CarlqvistJ等¨用柱切換法來進行樣品預處理,但儀器設備復雜、操作煩瑣。故阿莫西林HPLC法多用直接沉淀蛋白法來處理血樣。鑒于本研究需針對同一樣本中的2種組分進行分離分析,我們先后考察了高氯酸、乙腈除蛋白,但雜質峰與阿莫西林峰重疊,分離度不理想,最終選用甲醇除蛋白。調控柱溫的方式,建立了相同的樣品預處理方法,不同的色譜條件分離分析人血漿中雙氯西林和阿莫西林的高效液相色譜法。
                        關鍵詞:阿莫西林液相色譜儀檢測 液相色譜儀 高效液相色譜儀 雙氯西林 

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